鑠思百檢測

DETECTION OF TECHNICAL SOUSEPAD

高效液相色譜儀（HPLC）

?項(xiàng)目簡介

HPLC是以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的分析，具體分為定性與定量。

HPLC主要可解決如下幾方面的問題：不揮發(fā)性化合物分析測定；極性化合物的分析測定；熱不穩(wěn)定化合物的分析測定；大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析測定。但是，區(qū)別于液質(zhì)聯(lián)用（LCMS），LCMS一般可以通過對(duì)物質(zhì)的碎片峰信息進(jìn)行定性或定量，HPLC是通過物質(zhì)出峰時(shí)間及峰面積來定性或定量。所以，目前高效液相色譜在環(huán)境領(lǐng)域，主要應(yīng)用于有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)參照情況下，且待測物質(zhì)純度較高，出峰時(shí)間及峰形不受其余物質(zhì)干擾的定性或定量分析。

另外，所有色譜質(zhì)譜類測試，涉及參數(shù)往往很多。我們會(huì)依據(jù)您的參考文獻(xiàn)，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)存條件與經(jīng)驗(yàn)，盡量使用相同或者相似的參數(shù)或配件。由于測試影響因素太多，沒有辦法保證測試參數(shù)或結(jié)果完全符合您的預(yù)期，請(qǐng)慎重考慮，謝謝！

測試前請(qǐng)務(wù)必詳細(xì)填寫對(duì)接單，更多測試要求請(qǐng)咨詢工程師。

?樣品要求

HPLC樣品要求：粉體樣品需要提供20mg以上，液體樣品需要提供0.5ml以上，在常規(guī)溶劑中溶解性較好。

?結(jié)果展示

1、液相色譜圖：液相色譜圖顯示了化合物的分離，色譜圖是在某檢測波長處查看的。Y軸為強(qiáng)度，X軸為保留時(shí)間。

2、本測試不包含數(shù)據(jù)分析以及作圖服務(wù)，僅提供測試數(shù)據(jù)！！如需數(shù)據(jù)分析，本公司數(shù)據(jù)分析部門收費(fèi)提供。如需提供源文件，請(qǐng)務(wù)必提前說明。注意：源文件往往需要儀器配套的軟件打開，由于該軟件被各儀器廠商用序列號(hào)控制（儀器和軟件之間一對(duì)一綁定，在別的計(jì)算機(jī)上裝不了），因此對(duì)應(yīng)軟件我們不提供！

3、HPLC測試，不同于icp等測試，測試條件、后續(xù)自行分析都較為復(fù)雜，請(qǐng)您適當(dāng)積累一定的測試知識(shí)，便于您后續(xù)數(shù)據(jù)處理。

?常見問題

1. HPLC如何定量？

答∶HPLC定量時(shí)，最常使用外標(biāo)法（定量原理：峰面積或者峰高隨濃度的變化而相應(yīng)變化）。若使用其他定量方式，請(qǐng)?zhí)崆皽贤?/span>。若使用外標(biāo)法，除填寫對(duì)接單外，您需要在對(duì)接單中額外補(bǔ)充：

A、目標(biāo)物質(zhì)的標(biāo)品-做外標(biāo)；

B、目標(biāo)物質(zhì)的濃度范圍-決定外標(biāo)定量范圍。

2. HPLC如何定性？

答∶HPLC定性時(shí)，是以保留時(shí)間定性。此步驟也需要您提供標(biāo)準(zhǔn)品，通過比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品與待測物質(zhì)的保留時(shí)間來定性。如果您樣品成分復(fù)雜，存在待測物質(zhì)的出峰情況受樣品中其他物質(zhì)的干擾的可能性，就算保留時(shí)間能與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)上，但不能確認(rèn)樣品中含有該標(biāo)準(zhǔn)品物質(zhì)。所以HPLC用于定性時(shí)目標(biāo)物質(zhì)純度應(yīng)該較高。

3. 目標(biāo)物質(zhì)含量較低，可能測不出怎么辦？

可以進(jìn)行濃縮的預(yù)處理，因?yàn)橐话闾烊粯油枯^低，低于檢出限，但是富集之后可以在檢出限內(nèi)進(jìn)行定量）。缺點(diǎn)是需要確認(rèn)合適的預(yù)處理步驟。

具體的濃縮的預(yù)處理過程務(wù)必由客戶提供，因?yàn)椴煌繕?biāo)物質(zhì)濃縮步驟往往有所區(qū)別，根據(jù)目標(biāo)物選擇合適的濃縮步驟，對(duì)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性有著至關(guān)重要的作用。

4. 儀器的檢出限是多少？

答∶正如毒理學(xué)中“拋開劑量談毒性”的含義，HPLC檢出限也并不是一個(gè)準(zhǔn)確值。

檢出限的定義為：某特定分析方法在給定的置信度內(nèi)可從樣品中檢出待測物質(zhì)的最小濃度或最小量。即，拋去其他細(xì)節(jié)因素，主要影響HPLC檢出限的是測試方法以及對(duì)應(yīng)測試物質(zhì)。

舉例：假如客戶A的樣品是液體樣，需要檢測其中四環(huán)素的含量。那么我們需要先按照測試方法設(shè)置好儀器，然后進(jìn)標(biāo)樣，直到可以判定標(biāo)品中存有濃度明顯高于空白（大多是3倍噪聲）的四環(huán)素出峰，這一標(biāo)樣濃度可以稱為檢出限。

如果在自身樣品各種信息都沒有提供的前提下，直接問儀器檢出限是多少？就說明欠缺對(duì)檢出限定義、HPLC基礎(chǔ)原理的理解。

5. HPLC和LCMS最顯著的區(qū)別？

答∶液相色譜可以后搭多種檢測器，如紫外檢測器，熒光檢測器、蒸發(fā)光檢測器、質(zhì)譜檢測器等。搭配質(zhì)譜檢測器的這類成為LCMS。兩者本身的重點(diǎn)就有所偏重。前面幾種檢測器，在判定物質(zhì)時(shí)，更依賴于標(biāo)品定性，一般是默認(rèn)一個(gè)峰為一個(gè)物質(zhì)，因此對(duì)分峰要求較為嚴(yán)格；而LCMS由于其質(zhì)譜檢測器的靈敏性，重點(diǎn)在于碎片的區(qū)分。即使LCMS上顯示是一個(gè)峰，也可以根據(jù)質(zhì)譜數(shù)據(jù)判定前半個(gè)峰、后半個(gè)峰、甚至峰頂是否是同一個(gè)物質(zhì)。所以屬于兩種檢測手段，兩者數(shù)據(jù)不具有對(duì)比性。

?測試提示：

1.可開正規(guī)測試發(fā)票，附帶測試清單。

2.有腐蝕性，毒性，或其他有危害性等特殊樣品要事先告知測試人員，測試人員也要告知樣品方哪些樣品不能測或會(huì)對(duì)儀器產(chǎn)生損傷，測試后會(huì)對(duì)樣品產(chǎn)生哪些變化；

3.客戶需提供詳細(xì)的樣品資料，包括元素，主要成分和詳細(xì)測試參數(shù)及條件。和測試人員充分討論，商定最終測試條件；

4.測試人員與顧客通過QQ，微信或郵件溝通，出現(xiàn)測試糾紛，郵件或聊天記錄將作為重要的仲裁依據(jù)；請(qǐng)加QQ和技術(shù)人員交流。QQ：82187958。微信：15071040697

5.杜絕測試、解析和合成違反國家相關(guān)法律法規(guī)的樣品，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)將追究其法律責(zé)任。