冷凍電子顯微鏡樣品的制備觀察及應(yīng)用-第三方檢測(cè)

冷凍電子顯微鏡樣品的制備觀察及應(yīng)用

冷凍電子顯微鏡在生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用越來越受到重視，逐漸成為一種被普遍接受的研究生物大分子的有效手段，樣品的制備也需要注意，用于冷凍電子顯微鏡的樣品必須要非常的純凈，將冰凍的含水樣品放在親水的支持膜上，再包埋在一層比樣品較高的薄冰內(nèi)就可以了，而在樣品轉(zhuǎn)移到電鏡內(nèi)的過程中，樣品既不能在表面結(jié)霜，也不能解凍，所以需要對(duì)應(yīng)的冷凍輸送器來完成這一步驟。

由于電子顯微鏡場(chǎng)深很大，被觀測(cè)物品不同的層面可以同時(shí)被聚焦在一個(gè)像平面上，這就導(dǎo)致了電子顯微鏡的圖像不是樣品的三維圖像，而是一個(gè)樣品三維圖像在垂直于電子束方向的一個(gè)二維投影，對(duì)于較薄樣品，其電子顯微鏡成像的強(qiáng)度與樣品中的原子勢(shì)場(chǎng)分布的投影成正比。因此，電子顯微圖像可以直接的表示物體的原子勢(shì)場(chǎng)分布，從而反應(yīng)物體的原子密度分布投影。如何從二維投影中獲得三維結(jié)構(gòu)，就需要用的三維重構(gòu)原理。

應(yīng)用這一原理，如果我們能夠獲得樣品二維結(jié)構(gòu)的傅里葉變換的沿不同方向的中心截圖，并把它們?cè)诙S倒易空間中合并起來，獲得整個(gè)物品二維結(jié)構(gòu)在倒易空間中的三維傅里葉函數(shù)，就可以將次函數(shù)進(jìn)行逆傅里葉變換，來獲得整個(gè)樣品的三維結(jié)構(gòu)，鑠思百檢測(cè)可以提供電鏡等相關(guān)檢測(cè)。

冷凍電子顯微鏡可以應(yīng)用在以下方面：

（1）研究生物大分子處于不同功能狀態(tài)時(shí)的結(jié)構(gòu)

（2）為X射線解析提供初始相位以及初始分子置換模型

關(guān)鍵詞：冷凍電子顯微鏡、傅里葉、生物大分子、二維投影