鑠思百檢測可提供拉曼光譜儀測試服務(wù)，以下是拉曼光譜檢測中的疑難解答：

1.使用拉曼光譜儀測透明的有機物液體，測試時放到了玻璃片上測出來的結(jié)果是玻璃的光譜。

答：聚焦位置不對，聚在玻璃上了，用凹面載玻片，液體量會比較多，然后用顯微鏡聚焦好就可以了，如果液體有揮發(fā)性，最好液體上用蓋玻片，然后焦點聚焦到蓋玻片以下。

2. 做生物樣品的拉曼光譜，獲得的圖里面有很強的熒光，有人說，如果拉曼得不到就用其熒光譜。那么在拉曼譜里面得到的熒光背景，是真正的熒光特征譜嗎?這和熒光光譜儀里面的熒光圖有什么區(qū)別?

答：拉曼譜中的熒光和熒光譜中的熒光是一樣的，只要激發(fā)波長和功率密度相同。但有一點要注意，不同波長的激發(fā)光照射樣品，得到的拉曼相近，但熒光可以有很大不同，甚至相同波長不同功率激發(fā)，熒光譜都大不一樣。

3. 共焦顯微拉曼光譜儀?

答：共焦拉曼指的是空間濾波的能力和控制被分析樣品的體積的能力。通常主要是利用顯微鏡系統(tǒng)來實現(xiàn)的。

4. 激光拉曼測試，樣品如何預(yù)處理?

答： 一般來說，樣品都不需要做預(yù)處理，不象紅外那樣麻煩。分析固體和液體比較容易，氣體就難了，除非密度很大，否則只能用大型拉曼。

5.容易測得拉曼信號的樣品？

（1） 拉曼光譜的信號非常微弱，大致是瑞利散射的10e-61 ~1 0e-8的級別，普通的設(shè)計取得拉曼信號非常困難，所以需要加上較好的陷波濾波片盡量的消減瑞利散射。這樣，拉曼信號依然和背景大致相當，甚至更低，還需要考慮光譜儀本身的雜散光阻擋能力，使用何種探測器，樣本是否有熒光干擾等等。

（2）最好先確定實驗要求：需要自建組合系統(tǒng)；使用商業(yè)成套設(shè)備，可以根據(jù)實驗要求選擇設(shè)備等。

（3）用準直透鏡收集光本身不會增加光通量，反而會降低光通量。因為準直透鏡主要是收集平行光并將其耦合入光纖，其數(shù)值孔徑反而沒有光纖大，當光從四周散射過來時，光纖反而能收集到更大角度上的光。因此不推薦采用準直透鏡來收集光。另外如果做拉曼建議還是采用專用的光纖拉曼探頭。

6.拉曼光譜采用的是激光，不是單波長光嗎，那譜圖上怎么會有波長選擇范圍的呢？

答：激發(fā)光源用單色光－激光，激發(fā)出的拉曼信號可能分布在一個很寬的范圍內(nèi)，會同時激發(fā)出不同波長的拉曼信號。

激發(fā)光用的是單色的激光，如常用的488.0nm 514.5nm 785nm 1064nm，正因為激光的單色性好、準直性好、強度強等特點才用它；由于不同的基團與激發(fā)光作用后產(chǎn)生不同的拉曼位移，這么頻移有個范圍，即一般拉曼信號在4000~200cm-1范圍內(nèi)；使用不同的激發(fā)光源對于同一個基團而言，產(chǎn)生的拉曼位移位置不會變，只是強度不同而已。激發(fā)光源及其功率大小的選擇要考慮：是否會損傷（燒掉、降解）樣品；能否得到拉曼信號，也就是拉曼信號強弱問題。如RRS就是從選擇激發(fā)光源來增強拉曼信號的；另外還要避免熒光的干擾，可以用FT-Raman或使用Scissors（SSRS技術(shù)）。

7.用激光粒度儀做固體樣品時,應(yīng)該怎樣制備樣品?

為使顆粒處于單體狀態(tài)，在進行粒度測試前要對樣品進行分散處理。分散的方法有潤濕、攪拌、超聲波振動、分散劑等，有時這些方法可同時使用。我們現(xiàn)在是用的磁力攪拌加分散劑的方法。發(fā)現(xiàn)測大顆粒的時候攪拌時間過長會影響粒徑的大小，測出的結(jié)果偏小。干樣如果采用濕法分散測量粒度的話需要將樣品放入裝有溶劑（一般是水）的分散池中通過攪拌、超聲等方式分散。而干樣如果采用干法分散測量粒度的話可通過干法分散系統(tǒng)直接測量。

8.激光拉曼光譜儀應(yīng)該可以實現(xiàn)快速的定量分析，但經(jīng)過前段時間一些咨詢，使我對其是否可進行快速分析頗存疑問，尤其是氣體分析。請問，一般來說分析一次樣品（氣體或固體）的時間是多長。

分析速度取決于儀器的靈敏度和樣品本身。通常分析一個樣品，強信號幾秒鐘即可，若信號較弱，則需幾分鐘。做定量分析，儀器本身所需的時間很短，秒級。我用拉曼光譜測過白酒，但是光譜的重現(xiàn)性很差，而且檢測限不是很好。采樣軟件上有自帶的基線扣除功能。對于一個樣品，如果我要測定三次。如果每次都掃描了本底，然后測光譜，那么三條光譜的重現(xiàn)性就比較差，如果說只測定一次本底，然后掃描三次樣品，那么樣品的重現(xiàn)性就比較好?？傮w做下來，拉曼的定量效果肯定是不如近紅外，但是拉曼光譜到底能否應(yīng)用于定量，有待進一步驗證，我做的是低檔的白酒，幾乎都是勾對的，所以定量的時候預(yù)測的效果還可以，采用原始光譜預(yù)測標準差可達到86％。不知換了其他樣品的效果如何，有待進一步研究。

9.通過拉曼來驗證我計算的準確性。拉曼和紅外的區(qū)別，他們大概的意思就是這2者之間的原理一樣，只是波長不一樣。是這樣么？

這兩者都是振動光譜，從這一點上面來說，原理是一樣的。但是紅外是吸收光譜，而拉曼是散射光譜。至于波長，拉曼采用的是激光作為激發(fā)源，波長范圍可以從紫外-可見-紅外都可以，最常見的是可見光和NIR的。而紅外只能選擇紅外光作為光源，包括從遠紅外到近紅外，平時最常用的是中紅外，100000px-1到10000px-1。從選擇法則上面來說，也就是什么樣的振動是紅外活性的，什么樣的振動是拉曼活性的，也是不一樣的。紅外活性（也就是可以被紅外檢測到的振動）必須是分子偶極矩發(fā)生變化，而拉曼活性的振動必須是有分子的極化性發(fā)生改變才能被檢測到。從信號強度來說，拉曼的信號很弱，通常10的6次方-8次方才有一個拉曼散射的光子。而相對來說，紅外的信號要強！所以在實際應(yīng)用中，紅外更廣泛一些！兩者的光譜可以作為互補來確定分子的結(jié)構(gòu)。

如需拉曼光譜儀測試，請聯(lián)系鑠思百檢測檢工程師。