凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)的原理

凱氏定氮法

凱氏定氮法是由丹麥化學(xué)家凱道爾于1883年建立的，現(xiàn)已發(fā)展為常量、微量、平微量凱氏定氮法以及自動(dòng)定氮儀法等，是分析有機(jī)化合物含氮量的常用方法。凱氏定氮法的理論基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)中的含氮量通常占其總質(zhì)量的16%左右(12%~一19%),因此，通過(guò)測(cè)定物質(zhì)中的含氮量便可估算出物質(zhì)中的總蛋白質(zhì)含量(假設(shè)測(cè)定物質(zhì)中的氮全來(lái)自蛋白質(zhì))，即: 蛋白質(zhì)含量=含氮量/16%。

凱氏定氮法是測(cè)定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無(wú)機(jī)銨鹽，然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨，隨水蒸氣蒸餾出來(lái)并為過(guò)量的硼酸液吸收，再以標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定，就可計(jì)算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定，可由其氮量計(jì)算蛋白質(zhì)含量，故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。

功能介紹

蛋白類樣品含氮量定量分析；可檢測(cè)谷物、土壤、食品、飼料、淤泥、沉積物和化學(xué)品中的氨、蛋白質(zhì)氮含量、酚、揮發(fā)性脂肪酸、氰化物、二氧化硫、乙醇等含量；測(cè)試范圍：0.1-200mg；氮回收率：99.5%

儀器結(jié)構(gòu)

為什么凱氏定氮法測(cè)定出的食品中蛋白質(zhì)含量為粗蛋白含量？

由于一般蛋白質(zhì)中含氮量約為16%，故在概略分析中，常用凱氏法(Kjeldahl)測(cè)出總氮量，再乘以系數(shù)6.25來(lái)求得。實(shí)際上，它是食品、飼料中含氮化合物的總稱，既包括真蛋白又包括非蛋白含氮化合物，后者又可能包括游離氨基酸、嘌呤、吡啶、尿素、硝酸鹽和氨等。此外，不同蛋白質(zhì)的氨基酸組成不同，其氮含量不同，總氮量換算成蛋白質(zhì)的系數(shù)也不同，如小麥和多數(shù)谷物的換算系數(shù)為5.80，水稻5.95，大豆5.7，多數(shù)食用豆和堅(jiān)果5.3，牛奶6.38等。粗蛋白只是一個(gè)粗略的概念。

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