HPLC高效液相色譜法流動相種類

高效液相色譜法（HPLC）是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、醫(yī)藥等領(lǐng)域分析分離技術(shù)。它基于液體流動相和固定相之間的相互作用，通過色譜柱將樣品分離成單個化合物，然后通過檢測器對每個化合物進行檢測和記錄。HPLC技術(shù)的主要類型包括反相、正相、離子交換和尺寸排阻色譜法。

高效液相色譜儀流動相類型有多種，流動相性質(zhì)對樣品的分離影響很大。

一、流動相類型：

1、按組成可分：單組分流動相和多組分流動相。

2、按極性可分：極性流動相、弱極性流動相和非極性流動相。

3、按作用可分：底劑和洗脫劑。

4、按使用方式可分：等度流動相和梯度流動相。

5、按用途可分：己烷、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈和水等。

采用二元或多元組合溶劑作為流動相，可以靈活調(diào)節(jié)流動相的極性和增加選擇性，改進分離和調(diào)整出峰時間。

二、流動相性質(zhì)：

1、底劑決定基本的色譜分離，洗脫劑對某幾個組分選擇分離。流動相組成改變，極性改變，可顯著改變組分分離狀況。

2、親水性固定液常采用疏水性流動相，即流動相的極性小于固定相的極性，稱為正相液液色譜，極性柱稱正相柱，正相柱的底劑用低極性溶劑，洗脫劑用極性較強的溶劑。

3、若流動相的極性大于固定液的極性，稱為反相液液色譜。非極性柱稱為反相柱，反相柱常以水為流動相的主體，再加入不同配比的有機溶劑做調(diào)節(jié)劑。

RP-HPLC的固定相為非極性溶劑，常用的固定相為十八烷基鍵合硅膠，流動相為極性溶劑，常用的流動相為甲醇和乙腈。

反相高效液相色譜(RP-HPLC)是由非極性固定相和極性流動相組成的液相色譜系統(tǒng)，與由極性固定相和弱極性流動相組成的液相色譜系統(tǒng)(正相色譜)正好相反。

RP-HPLC的典型固定相是十八烷基鍵合硅膠，典型流動相是甲醇和乙腈。RP-HPLC是目前液相色譜中最重要的分離模式，可以用來分離幾乎所有能溶于極性或弱極性溶劑的有機物。反相色譜適用于非極性、極性或離子型化合物的分離，大部分分析任務(wù)由反相色譜完成。

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