一、HPLC高效液相色譜圖中峰高、峰面積、峰面積比分別代表什么呢？

峰高指待測組分從柱后洗脫出最大濃度時檢測器輸出的信號值，單位一般為mAU，AU或mV，也可代表相對含量，但不如峰面積準確。峰面積指峰高與保留時間的積分值，單位一般相應為mAU*min，AU*min或mV*min，代表相對含量比較準確。

峰面積比代表各物質的相對百分含量，單位一般為%。

二、峰高和峰面積的選擇

在色譜定量分析中，選用峰高法還是選用峰面積法，主要決定在檢測器的線性范圍內(nèi)，峰高和峰面積測量的準確性和重復性。除了歸一化法最好用峰面積法外，其他三種定量方法中峰高和峰面積都可用作精確的定量方法。

在檢測器的線性范圍內(nèi)，峰高和峰面積測星的準確性受色譜分離度的影響，要準確地測量峰高和峰面積，色譜分離應達到一定的分離度才行。

三、HPLC高效液相色譜法怎么分析譜圖?

分析峰的個數(shù)，位置，峰高，峰面積

色譜圖其實簡單地講是一個橫坐標是時間;縱坐標是電信號的二維圖譜。

HPLC高效液相色譜法，你可以簡單地想象，固定相是一個多空海綿狀的柱形結構，樣品在孔洞中進進出出。因為各個物質的吸附能力不同，所以才會在色譜圖中拉開距離。

實驗相關的參數(shù):

保留時間是溶質通過色譜柱所需的時間。這種特性可以在一種混合物的幾個組分之間共享，這就是為什么應用MS方法的原因。由此產(chǎn)生的色譜圖顯示保留時間與強度(存在的組分量)的關系。

1、保留時間:也就是可以定性的數(shù)據(jù)參數(shù)

保留時間是溶質通過色譜柱所需的時間。這種特性可以在一種混合物的幾個組分之間共享，這就是為什么應用MS方法的原因。由此產(chǎn)生的色譜圖顯示保留時間與強度(存在的組分量)的關系。

如果使用同樣的色譜柱，同樣的流動相，分析同樣的樣品，那么這個樣品的保留時間，應該是固定的。不同保留時間的色譜峰，應該表現(xiàn)出的是不同的物質。如果你跑的是反相色譜，那么色譜峰越靠后，它對應物質的極性也就越小。

2、峰面積:也就是可以定量的數(shù)據(jù)參數(shù)

峰值檢測在濾波之后進行，其中峰值表示成分或成分的斷裂。峰可以根據(jù)它們覆蓋的高度或面積來選擇。通過將存在的峰與已知的峰進行匹配，可以通過眼睛識別某些峰模式。這可以幫助確定存在什么分子，或者分子中存在多少原子。

色譜圖中可以讀出來的參數(shù)，在同一個色譜條件下，同一個物質的濃度和峰面積是成正比的。也就是說，如果你配制1.0mgl ml.的X物質，進樣后峰面積是10000，那么，你配制0.5mg/ml的X物質，進樣后峰面積差不多就是5000

3、波長:這個是可以順利進行試驗的前提條件

同一樣品，同一方法，同一色譜柱，在不同波長的峰面積是不同的。一個物質指在某些特殊波長下有吸收。比如一個物質在210nm和254nm處有吸收。那么波長在280nm處可能無法檢出該物質。所以一個實驗方法開始時要進行波長掃描。

1，首先區(qū)分溶劑峰跟產(chǎn)物峰。在區(qū)分這兩個之前，你要知道一件事情。我們都是用高極性溶劑來溶解待測產(chǎn)物的(我用的是DMSO溶解的產(chǎn)物，它的極性在常用溶劑里面排第四)，所以如果你用的儀器如果不是正相色譜儀，5分鐘內(nèi)必定會出一個溶劑峰。除了這個溶劑峰以外，后面的就都是特征產(chǎn)物。做到了這一步你就成功了一半。

2，然后就是根據(jù)峰值數(shù)量的多少來判斷產(chǎn)物多樣性。主要是數(shù)哪些非常尖銳的峰，然后比大小。

3，最后就是各種產(chǎn)物的含量配比，比較峰高就行了。

4，高效液相色譜圖的目的就是在于探究待測物中產(chǎn)物多樣性以及含量配比情況。