SEM掃描電鏡樣品干燥方法——臨界點(diǎn)干燥和冷凍干燥的區(qū)別

掃描電鏡SEM觀察樣品要求在高真空中進(jìn)行。無(wú)論是水或脫水溶液，在高真空中都會(huì)產(chǎn)生劇烈地汽化，不僅影響真空度、污染樣品，還會(huì)破壞樣品的微細(xì)結(jié)構(gòu)。因此，樣品在用電鏡觀察之前必須進(jìn)行干燥。今天鑠思百檢測(cè)小編給大家介紹幾種干燥方法：空氣干燥法、臨界點(diǎn)干燥法、冷凍干燥 ；重點(diǎn)給大家介紹臨界點(diǎn)干燥法和冷凍干燥。

干燥方法優(yōu)缺點(diǎn)

空氣干燥優(yōu)點(diǎn)： 簡(jiǎn)便易行、節(jié)省時(shí)間

缺點(diǎn)：由于脫水劑揮發(fā)時(shí)表面張力的作用，組織塊會(huì)產(chǎn)生收縮變形

臨界點(diǎn)干燥優(yōu)點(diǎn)： 較好地保存樣品的微細(xì)結(jié)構(gòu)；操作較方便， 快速2～3小時(shí)即可完成，常用

缺點(diǎn)：需要特殊儀器設(shè)備---臨界點(diǎn)干燥儀。

含水樣品直接冷凍干燥優(yōu)點(diǎn)：無(wú)需脫水，不會(huì)使樣品收縮，較早使用的方法

缺點(diǎn)：花費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，消耗液氮多，易產(chǎn)生冰晶損傷，未被廣泛應(yīng)用.

樣品脫水后冷凍干燥優(yōu)點(diǎn)： 可減少冰晶損傷，且干燥時(shí)間短

缺點(diǎn)：有機(jī)溶劑對(duì)樣品成分有抽提作用，造成部分內(nèi)含物丟失。

一、空氣干燥法

基本描述：將經(jīng)過(guò)脫水的樣品，讓其暴露在空氣中使脫水劑逐漸揮發(fā)干燥 ，也可直接(不脫水)放在干燥器中干燥。

常用方法
方法1：?jiǎn)喂潭ɑ螂p固定→脫水→樣品置于100％的脫水劑中→在空氣中自然干燥；

方法2：固定→（組織導(dǎo)電處理）→浸泡在緩沖液與乙醚的1：1中5min→空氣干燥；

方法3：?jiǎn)喂潭ɑ螂p固定→乙醇脫水→浸沒(méi)于六甲基二硅胺烷HMDS中二次每次15min→通風(fēng)廚干燥1h

二、臨界點(diǎn)干燥法(CPD: critical point dryer)
1.基本含義：臨界點(diǎn)干燥法是利用物質(zhì)在臨界狀態(tài)時(shí)，其表面張力等于零的特性，使樣品的液體完全汽化，并以氣體方式排掉，來(lái)達(dá)到完全干燥的目的。

2.基本概念：臨界點(diǎn)：物質(zhì)的氣態(tài)和液態(tài)兩相之間達(dá)到相同密度、成為均一流體時(shí)的溫度和壓力的總稱。此時(shí)的溫度稱為臨界點(diǎn)溫度，壓力稱為臨 界點(diǎn)壓力。
3.中間劑：把用來(lái)置換脫水劑而后又被干燥劑所置換的液體。

4.常用干燥劑

co2，F(xiàn)-13，F(xiàn)-23，F(xiàn)-116，N2O

5.常用中間劑：
中間劑：把用來(lái)置換脫水劑而后又被干燥劑所置換的液體。
試劑：醋酸（異）戊酯、丙酮

6.干燥過(guò)程：固定脫水→轉(zhuǎn)入中間液→移至樣品室→用液體CO2置換醋酸異戊酯 →CO2汽化排氣→干燥

7.臨界點(diǎn)干燥失?。ú粡氐祝┑脑颍?br />(1) 脫水不徹底
(2) 醋酸異戊酯反流
(3) 樣表粘有過(guò)多醋酸異戊酯
(4) 樣品量過(guò)多
(5) 樣品室溫度高，注入CO2困難注入CO2量太少
(6) 樣品室漏氣

三.冰凍干燥
1.基本描述：將經(jīng)過(guò)冷凍的樣品置于高真空中，通過(guò)升華除去樣品中的水分或脫水劑的過(guò)程.

2.含水樣品直接冷凍干燥常規(guī)步驟： 取材→固定→冷凍保護(hù)處理→快速冷凍→升華（10-2乇）干燥→裝臺(tái)鍍膜

3.樣品脫水后的冷凍干燥基本描述：樣品用乙醇或丙酮脫水后過(guò)渡到某些易揮發(fā)的有機(jī)溶劑中，然后連同這些溶劑一起冷凍并在真空中升華而達(dá)到干燥。