激光共聚焦掃描顯微鏡的用途是什么? 二維碼
發(fā)表時(shí)間:2022-06-21 17:02作者:鑠思百檢測(cè) 激光共聚焦掃描顯微鏡的用途是什么? 激光共聚焦掃描顯微鏡的用途是什么,今天鑠思百檢測(cè)小編帶大家詳細(xì)了解一下 激光共聚焦掃描顯微鏡的原理和用途。 激光掃描共聚焦顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先進(jìn)的細(xì)胞生物醫(yī)學(xué)分析儀器之一。它是在熒光顯微鏡成像的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激光熒光探針,利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像處理,不僅可觀察固定的細(xì)胞、組織切片,還可對(duì)活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、分子、離子進(jìn)行實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)地觀察和檢測(cè)。目前,激光掃描共聚焦顯微技術(shù)已用于細(xì)胞形態(tài)定位、立體結(jié)構(gòu)重組、動(dòng)態(tài)變化過程等研究,并提供定量熒光測(cè)定、定量圖像分析等實(shí)用研究手段,結(jié)合其他相關(guān)生物技術(shù),在形態(tài)學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)等分子細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。 激光共聚焦掃描顯微鏡既可以用于觀察細(xì)胞形態(tài),也可以用于細(xì)胞內(nèi)生化成分的定量分析、光密度統(tǒng)計(jì)以及細(xì)胞形態(tài)的測(cè)量,配合焦點(diǎn)穩(wěn)定系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)長時(shí)間活細(xì)胞動(dòng)態(tài)觀察
激光掃描共聚焦顯微鏡儀器功能: 激光掃描共聚焦顯微鏡是采用激光作為光源,在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計(jì)算機(jī)對(duì)所觀察的對(duì)象進(jìn)行數(shù)字圖象處理的一套觀察、分析和輸出系統(tǒng)。主要包括激光光源、自動(dòng)顯微鏡、掃描模塊(包括共聚焦光路通道和針孔、掃描鏡、檢測(cè)器)、數(shù)字信號(hào)處理器、計(jì)算機(jī)以及圖象輸出設(shè)備等。
激光共聚焦掃描顯微鏡的用途: 一、細(xì)胞物理會(huì)生物化學(xué)測(cè)定: 激光共聚焦顯微鏡可進(jìn)行低光探測(cè)、活細(xì)胞定量分析和重復(fù)的熒光定量分析,從而能對(duì)單細(xì)胞或細(xì)胞群的溶酶體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、細(xì)胞骨架、結(jié)構(gòu)性蛋白質(zhì)、DNA、RNA、酶和受體分子等細(xì)胞特異結(jié)構(gòu)的含量、組份及分布進(jìn)行定性、定量、定時(shí)及定位測(cè)定;同時(shí)還可測(cè)定分子擴(kuò)散、膜電位、氧化-還原狀態(tài)和配體結(jié)合等生化反應(yīng)變化程度。
二、圖像重建: 顯微鏡通過薄層光學(xué)切片功能,可獲得三維數(shù)據(jù),經(jīng)過計(jì)算機(jī)圖像處理及三維重建軟件,沿X、Y和Z軸或其它任意角度來觀察標(biāo)本的外形及剖面,并得到三維的立體結(jié)構(gòu),從而能十分靈活、直觀地進(jìn)行形態(tài)觀察,并揭示亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系。
三、熒光的定量、定位分析: 顯微鏡可對(duì)單標(biāo)記或雙標(biāo)記細(xì)胞及組織標(biāo)本的共聚焦熒光進(jìn)行定量分析,并顯示熒光沿Z軸的強(qiáng)度變化;同時(shí)還可自動(dòng)將熒光圖像與象差圖像重疊以顯示熒光在形態(tài)結(jié)構(gòu)上的精確定位。 激光共聚焦顯微鏡還可測(cè)量標(biāo)本深層的熒光分布。也適用于高靈敏度的快速熒光測(cè)定,準(zhǔn)確地監(jiān)測(cè)抗原表達(dá)、熒光原位雜交斑點(diǎn)及細(xì)胞結(jié)合的形態(tài)學(xué)特性,并作定量分析。
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