高效液相色譜法的基本原理及構(gòu)造

高效液相色譜法的原理和構(gòu)造是什么？

縱觀高校液相色譜儀的教學(xué)現(xiàn)狀，液相色譜互動教學(xué)系統(tǒng)使用的是越來越多，之所以這套教學(xué)系統(tǒng)能逐漸取代傳統(tǒng)的實驗教學(xué)模式，成為藥學(xué)院、生物學(xué)院師生中廣受贊譽的實驗室分析儀器，其中的原因當(dāng)然是它可以有效提高學(xué)生對液相色譜實驗的操作機會，有效提升學(xué)生對液相色譜運行原理知識的掌握。關(guān)于高效液相色譜法的原理和構(gòu)造是什么？

高效液相色譜法的原理：

高效液相色譜（HPLC）法是以高壓下的液體為流動相，并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術(shù)。高效液相色譜對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中，可用氣相色譜分析的約占20%，而80%則需用高效液相色譜來分析。高效液相色譜和氣相色譜在基本理論方面沒有顯著不同，它們之間的重大差別在于作為流動相的液體與氣體之間的性質(zhì)的差別。

高效液相色譜儀工作原理：

高壓泵將貯液罐的流動相經(jīng)進樣器送入色譜柱中，然后從檢測器的出口流出，這時整個系統(tǒng)就被流動相充滿。當(dāng)欲分離樣品從進樣器進入時，流經(jīng)進樣器的流動相將其帶入色譜柱中進行分離，分離后不同組分依先后順序進入檢測器，記錄儀將進入檢測器的信號記錄下來，得到液相色譜圖。

高效液相色譜儀法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上，引用了氣相色譜的理論，在技術(shù)上，流動相改為高壓輸送，色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜（每米塔板數(shù)可達幾萬或幾十萬），同時柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進行連續(xù)檢測。

高效液相色譜法的構(gòu)造

可分為“高壓輸液泵”、“色譜柱”、“進樣器”、“檢測器”、“餾分收集器”以及“數(shù)據(jù)獲取與處理系統(tǒng)”等部分。

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