LCMS液質聯(lián)用儀是做什么的？LCMS液質聯(lián)用儀是指將液相色譜儀和質譜儀聯(lián)合起來使用的儀器，主要用于不易揮發(fā)、強極性、熱不穩(wěn)定及高分子量化合物的分析，具體分為定性與定量。
LCMS主要可解決如下幾方面的問題：不揮發(fā)性化合物分析測定；極性化合物的分析測定；熱不穩(wěn)定化合物的分析測定等。但是，區(qū)別于氣質聯(lián)用（GCMS），LCMS一般沒有商品化的譜庫可對比查詢，只能自行解譜。所以，目前液質聯(lián)用在環(huán)境領域，主要應用于有標準物質參照情況下的定性分析。接下來鑠思百檢測小編給大家介紹一下LCMS是怎么測試的。
一、LC-MS如何工作？
第一步：液相色譜分離
LC使液體樣品或固體樣品溶液中的分析物發(fā)生物理分離。將幾微升樣品溶液注入流動的溶劑流中，稱為流動相。盡管最佳進樣量取決于實驗條件，但使用自動進樣器可以精確進樣0.1μL至100μL的樣品。流動相連續(xù)泵送通過通常填充有涂覆有另一種液體（固定相）的二氧化硅顆粒的色譜柱（不銹鋼管）。當樣品溶液-流動相混合物到達色譜柱時，其成分將根據其化學組成或物理性質與固定相（保留在色譜柱中）進行微分作用。根據分析物與固定相之間相互作用的機理，LC分離已分為不同模式，例如：
分配色譜法：基于分析物在固定相中與流動相相比的溶解度和疏水性不同。
離子交換色譜：根據其離子電荷分離分析物。
尺寸排阻色譜法：利用分析物分子大小的差異來分離它們。
親和色譜法：根據分析物與固定相結合的能力對其進行分離。
一些分析物與固定相的相互作用要強于其他固定相，導致它們在通過色譜柱時分離。與固定相的相互作用最小的分析物首先從色譜柱中流出。隨著流動相繼續(xù)流過色譜柱，其余的分析物會被順序沖出，相互作用最強的分析物會最后出現。特定分析物在色譜柱中花費的時間是該分析物的特征，稱為其保留時間（RT）。
第二步：LC檢測
流出色譜柱（洗脫液）的流動相通過檢測器，該檢測器“響應”其中的分析物的某些物理或化學性質，例如折射率或光吸收率。該響應被捕獲為信號或“峰”，其強度（峰面積或峰高）與樣品中存在的組分量相對應。檢測器“看到”分析物的時間就是其RT。樣品中化合物的身份可以通過將其RT與已知化合物的RT進行比較來確認。雖然這不是化合物鑒定的準確方法，但如果事先了解有關樣品的某些信息，它會有所幫助。
第三步：使用MS進行LC檢測
雖然各種各樣的檢測器的不同技術和敏感性已被加上LC用于分析不同樣品類型中，質譜儀已經成為一種選擇性的，靈敏的和普遍的檢測器。
與其他檢測器不同，攜帶分離的分析物的LC洗脫液不允許流入質譜儀。當LC系統(tǒng)在環(huán)境壓力下運行時，質譜儀在真空下運行，并且兩者通過接口耦合。當色譜柱洗脫液流入界面時，通過加熱使溶劑蒸發(fā)，分析物分子蒸發(fā)并離子化。這是至關重要的一步，因為質譜儀只能檢測和測量氣相離子。
由于分析物離子是在界面上的大氣壓下生成的，因此該過程稱為大氣壓電離（API），并且界面被稱為API源。電噴霧電離（ESI）和大氣壓化學電離（APCI）是LC-MS分析中最常用的來源。
被分析物離子被吸入質譜儀中，并在其中受到電場和/或磁場的影響。通過改變所施加的場來改變離子的飛行路徑，這確保了離子在其荷質（m/z）比值的基礎上彼此分離。分離后，可以通過各種質量檢測器收集和檢測離子，其中最常見的是電子倍增器。當分離的離子撞擊電子倍增器（倍增極）的表面時，釋放出二次電子。這些二次電子通過一系列倍增極級聯(lián)而倍增。在任何給定的時間點，測量由二次電子流產生的放大電流，并將其與質譜儀中的離子濃度相關聯(lián)（如下圖1）。
圖1：LC-MS設置示意圖。
第三步：繪制LC-MS數據
通過LC-MS分析樣品期間測得的離子豐度繪制為總離子色譜圖（TIC）。該圖顯示了分析物離子的峰強度與其RT的關系。此外，色譜圖中的每個點都與質譜關聯(lián)。質譜圖描繪了離子豐度與測得的m/z值的關系（如下圖2）。
圖2：LC-MS分析輸出圖。
化合物的質譜不僅提供有關母體化合物質量的信息（根據其離子的m/z值），而且還有助于根據同位素質量峰的相對豐度闡明化合物的結構。分析物峰的面積用于其定量。
質譜儀可以兩種模式操作，a）掃描和b）選定的離子監(jiān)測（SIM）。在掃描模式下，設置為在指定時間段內檢測從低m/z到高m/z值的所有離子。當分析未知樣品或沒有有關樣品中離子的可用信息時，使用此模式。在SIM模式下運行時，將質譜儀設置為測量特定的m/z值。這是對樣品中已知化合物進行準確定量的首選操作模式。
二、LC-MS可以測什么
LC-MS已廣泛應用于分析各種基質中的小分子和大蛋白分子。這項技術的應用包括：
三、LC-MS的優(yōu)缺點
優(yōu)點
LC-MS適用于分析極性和非極性化合物以及不耐熱分子。這些化合物的范圍從m/z值<1000Da的低分子量分析物到m/z值>100000Da的非常高分子量的蛋白質?；衔锏摹败涬婋x”主要產生分子離子和同位素峰，這有助于確定分析物的準確質量和推定公式。當與碎裂光譜耦合時，可以闡明分析物的結構。
盡管通過LC-MS分析通常需要幾毫克的純化合物，但少至1毫克就足夠了。通過在SIM或SRM模式下運行MS，可以達到ng/mL甚至pg/mL范圍內的檢測極限。由于在SRM模式下僅監(jiān)測特定離子，因此即使對于復雜基質中存在的分析物也能實現選擇性。
局限性
LC-MS儀器的擁有，操作和維護都很昂貴。需要專業(yè)知識來運行儀器和分析數據。與其他分析技術相比，樣品通量中等。由于獲得的光譜取決于實驗條件，包括儀器類型，因此通過與參考光譜進行比較來鑒定化合物的范圍受到限制。由于質譜儀是一種破壞性檢測器，因此在處理可能不容易獲得或無法大量獲得的樣品時必須格外小心。作為基于實驗室而非現場的技術，通過LC-MS分析不穩(wěn)定或反應性樣品可能具有挑戰(zhàn)性。
由于只能將液體樣品注入色譜柱，因此必須將固體樣品溶解在合適的溶劑中，或者必須從樣品中提取分析物。通過液-液萃?。↙LE）或固相萃?。⊿PE）等技術進行樣品制備對于從復雜樣品（例如血漿，食物和土壤）中萃取目標分析物至關重要。這不僅有助于提高分析的靈敏度，還可以減少系統(tǒng)的污染（在下一節(jié)中討論）。
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